Категории



Реакция «Clinistix



п-Нитроанилиновая реакция



Диагностическое значение



Отдельные специфические подходы



Кетоны

Разные лаборатории




Новости

Флюорогенные субстраты

Лизосомы

Как обсуждалось

Методом бумажной

Цветные тесты могут

Нитрозонафтоловая реакция

Цианиднитропруссидная реакция

Реакция

Сообщалось

Тест с хлоридом железа



В этом тесте



Диагностическое значение



Самый полезный



Наконец, мы встречаемся



Определенные на нарушения



Страницы


2

4

6

8

10


Тэги сайта:

посмотреть все ключевые тэги

А. Мухин
A. Mukhin

На протяжении уже трех десятилетий b(beta)-блокаторы с успехом применяются для лечения различных сердечно-сосудистых заболеваний, но при ряде патологических состояний, несмотря на их несомненную высокую эффективность, они используются недостаточно часто, а если и назначаются, то в неадекватно малых дозах. Так, при обследовании больных, перенесших инфаркт миокарда (ИМ) и уже выписавшихся из стационара, было установлено, что только 58% из них получали b(beta)-блокаторы и лишь у 11% получавших дозировки были эквивалентны половине средней эффективной дозы.
В обзоре проанализирована литература, в которой описывается применение b(beta)-блокаторов при артериальной гипертензии, стенокардии, остром ИМ и следующим за ним периоде, а также при застойной сердечной недостаточности (ЗСН). Рассмотрены вопросы конкретного выбора b(beta)-блокаторов и их переносимости. Особое внимание уделено потенциальным преимуществам новых длительно действующих препаратов этой группы.
Данные литературы показывают, что практически все b(beta)-блокаторы могут с успехом применяться при лечении гипертонии. В ходе большого клинического исследования назначение при гипертонии пропранолола гидрохлорида, метопролола, атенолола и пиндолола привело к значительному снижению заболеваемости и смертности вследствие сердечно-сосудистой патологии. При этом было установлено, что длительный прием подобных препаратов способствует уменьшению гипертрофии левого желудочка. ...
Читайте полную новость...

Флюорогенные субстраты, а иногда и радиоактивно меченные субстраты создают основу лабораторного подхода к ферментативной диагностике этих нарушений.
В табл. 140 перечислены основные клинические формы нарушения, а также предполагаемые природные субстраты, синтетические субстраты и принципы исследования. Уместно сказать здесь несколько слов о проблемах и неожиданностях, встречающихся при этих исследованиях.
СМрганглиозидоз является загадкой. Современные методы с использованием флюориметрических субстратов не позволяют обнаружить различия между младенческой и юношеской формами болезни по активности ферментов в лейкоцитах, что могло бы объяснить весьма существенные вариации в клиническом течении этих заболеваний.

Лизосомы —это субклеточные органеллы, по-видимому, выполняющие роль «мусорной ямы»1 для компонентов клетки, которые должны распадаться до простейших строительных блоков, т. е. моносахаридов, аминокислот, жирных кислот и других простых компонентов (см. гл. 30). Вещества, которые должны расщепляться кислыми гидролазами, находящимися внутри лизосом, поступают туда путем эндоцитоза.
Большинство лизосомных ферментов — это экзогидролазы: подлежащий деградации компонент отщепляется последовательно, начиная с периферического места своего присоединения в молекуле. Следовательно, прерывание поэтапного процесса деградации приведет к накоплению материала, неспособного выйти из лизосомы, и это будет продолжаться до тех пор, пока материала не окажется так много, что он серьезно нарушит функционирование лизосом и в конце концов всех систем клетки. Вообще говоря, лизосомные ферменты проявляют скорее групповую специфичность, нежели специфичность к субстрату. Для клетки это означает, что несколько различных компонентов, имеющих группы соответствующей конфигурации (например, а или р для углеводов), могут быть объектом поэтапного расщепления одним ферментом, узнающим данную группу, а также соседние. Свойство «групповой специфичности» можно использовать в лаборатории, применяя и синтетические субстраты, сохраняющие основную конфигурацию (а часто и соседние), но лишенные остальных групп, которые в клетке присоединены к «природному субстрату».

Как обсуждалось в главе о нервно-дегенеративных нарушениях (сфинголипидозы и мукополисахаридозы), отсутствие специфической лизосомной гидролазы, которая удаляет замещаемую группу в сложном липидном или углеводном компоненте мембран, приводит обычно к обширному накоплению нерасщепленного материала. Очень часто центральная нервная система в наибольшей мере страдает от такого накопления, приводящего в конечном счете к прогрессирующей и необратимой умственной отсталости. При другом типе клинических проявлений ЦНС щадится, но поражаются внутренние органы и скелет. Эти несколько упрощенные клинические варианты” подробнее обсуждаются в соответствующих главах. А здесь достаточно сказать, что наличие у ребенка прогрессирующего поражения мозга, внутренних органов и скелета всегда требует дальнейшего обследования в связи с возможной лизосомной болезнью накопления. Не вдаваясь в подробности клинического обследования такого больного, поскольку они обсуждались в гл. 18, мы хотели бы рассмотреть природу лизосомных ферментов и их субстратов, а также ее значение для приготовления и транспортировки образцов.

Методом бумажной хроматографии не удается разделить множество органических кислот в моче так же четко, как делятся аминокислоты. В отсутствие запаха (его наличие часто позволяет установить диагноз) и при отрицательных результатах цветных тестов мы обычно применяем бумажную хроматографию с окраской диметиламинодифенилметанолом, чтобы выявить те образцы, которые требуют дальнейшего исследования. И опять-таки сокращаем предварительную обработку в случае критической клинической ситуации.
В прошлом для количественного определения и идентификации органических кислот было необходимо проводить газовую хроматографию и масс-спектрометрию. Однако по мере того, как накапливались сведения о поведении органических кислот на колонках различной селективности, часто становилось возможным (в случае хорошо описанных органических ацидемий) поставить диагноз с помощью исследований на двойных колонках. Экстракция органических кислот, в разной степени растворимых в липидах и воде, методологически трудна, что часто приводит к широким вариациям определяемых количеств метаболитов при таких нарушениях. При самых тяжелых формах нарушений неполное извлечение метаболита из биологической жидкости не повлияет на диагноз и лечение, но может иметь значение для метаболических исследований.

Цветные тесты могут быть выполнены очень быстро из-за отсутствия специфичности и относительной нечувствительности реакций к соединениям, концентрация которых ниже порогового уровня. Следовательно, если положительный тест указывает на наличие врожденного нарушения обмена, отрицательный тест (в клинически подозрительной ситуации) нельзя считать достаточным доказательством отсутствия метаболического нарушения. Судя по нашему опыту, даже при использовании более чувствительных и определенных методов, описанных ниже, многие нарушения промежуточного обмена носят относительно скрытый характер (с точки зрения исследования мочи), за исключением периодов явного клинического ухудшения. Самым ярким подобным примером являются органические ацидемии. Кроме того, кажущуюся простоту выполнения цветных тестов не следует истолковывать как допустимость небрежности в методике. Если лаборатория, осуществляющая такие тесты, не владеет всем диапазоном метаболических исследований, клинические выводы могут оказаться ошибочными.
В качестве дополнения к цветным тестам мы, как показано на, обычно проводим одномерную бумажную хроматографию аминокислот и органических кислот. Когда нитропрус-сидный тест положителен, мы дополнительно разгоняем хрома-тограмму для окрашивания нитропруссидным реагентом с целью разделения гомоцистина и цистина. Методы бумажной хроматографии существуют со времен второй мировой войны и пользуются широкой популярностью в метаболических лабораториях благодаря минимальной необходимой подготовке образцов и хорошей воспроизводимости результатов в опытных руках. Поскольку в этой системе разделяются не все аминокислоты и их количественное определение невозможно, для решения обеих задач мы прибегаем к ионообменной хроматографии. Это необходимо, когда результаты других исследований необычны или сомнительны либо когда болезнь так серьезна, что малейшая задержка с диагнозом недопустима.

Нитрозонафтоловая реакция является тестом на присутствие тирозина и его метаболитов. Ложноположительные результаты этой реакции часто отмечаются в моче больных, страдающих желудочно-кишечными нарушениями. Эта реакция обусловлена, по-видимому, присутствием параоксифенилуксусной кислоты и подобных ей метаболитов, продуцируемых кишечными бактериями, и потому наиболее характерна для состояний, при которых наблюдается избыточный рост бактерий.

Цианиднитропруссидная реакция является тестом на соединения, содержащие сульфгидрильную группу. Чаще всего положительную реакцию дают цистин и гомоцистин. Реакция с нитропруссидом серебра была предложена как способ отличить гомоцистин от цистина. Однако этот тест — ненадежное средство дифференцировки указанных аминокислот, и мы используем вместо него бумажную хроматографию с последующим окрашиванием нитропруссидом. В то же время мы столкнулись с несколькими случаями, когда моча давала ложнополо-жительную реакцию с реагентом сразу после добавления цианида, но перед добавлением нитропруссида. Причина такой лож-ноположительной реакции пока не установлена. Как и в реакции с паранитроанилином, крайне важна окраска, возникающая при действии нитропруссида. При положительной реакции образуется фуксиново-красный продукт. В случае высокой концентрации в моче креатинина в ходе реакции образуется продукт, окрашенный в оранжево-розовый цвет. Параллельно с пробами, взятыми у больных, всегда необходимо ставить контрольный образец мочи с добавленным в нее цистином.

Реакция «Clinistix» — это тест на восстановленные вещества. По существу он предназначен для определения в моче восстановленных Сахаров. Ложноположительные результаты отмечаются редко, но когда в моче присутствует в больших количествах ампициллин или подобные ему производные пенициллина, реакция бывает слабоположительной. Положительную реакцию с этим реагентом могут давать также лекарства, которые выводятся в виде глюкуронидов.